#2 contro Angelique Kerber alla finale del Cincinnati Masters 2016
La ceca ha vinto il suo primo titolo Premier 5 battendo in finale Angelique Kerber
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Dopo un Wimbledon deludente e un'uscita al terzo turno alla Rogers Cup, Karolina Pliskova ha saltato le Olimpiadi ed è tornata a giocare al Cincinnati Masters poco prima degli US Open. Pliskova era il 15nstesta di serie e ha iniziato il suo torneo con una vittoria consecutiva sulla futura campionessa del Grande Slam Jelena Ostapenko prima di eliminare la giapponese Misaki Doi nel terzo turno per raggiungere i quarti di finale.
Nei quarti, il ceco ha vinto una battaglia tesa contro 7nstesta di serie Svetlana Kuznetsova in tre set per qualificarsi per le semifinali dove ha sconfitto comodamente 4nstesta di serie Garbine Muguruza (perdendo solo quattro partite nel processo) per raggiungere la finale. In finale, ha affrontato la testa di serie Angelique Kerber, che sarebbe stata incoronata la nuova n. 1 del mondo a condizione che avesse vinto la partita.
La partita si è rivelata completamente a senso unico poiché Pliskova ha vinto il primo set 6-3 prima di battere la sua avversaria tedesca nel secondo set 6-1 per vincere il suo primo titolo WTA Premier 5. La vittoria di Pliskova non solo ha impedito a Kerber di raggiungere la vetta della classifica, ma ha anche esteso la permanenza di Serena Williams in vetta a 186 settimane consecutive, battendo così il record di Steffi Graf di 185 settimane consecutive in vetta alla classifica WTA.